「口蹄疫抗体」什么是口蹄疫疫苗(为何口蹄疫疫苗产品有显著不同的免疫效果)
今天,神州网给大家普及下关于「口蹄疫抗体」什么是口蹄疫疫苗(为何口蹄疫疫苗产品有显著不同的免疫效果)的知识。
口蹄疫你应该知道的事
口蹄疫具有强烈的传染性,可带来严重的经济损失。除了生物安全,疫苗免疫是防控口蹄疫最经济最有效的手段。安全高效的疫苗是成功预防乃至净化口蹄疫的先决条件。口蹄疫疫苗质量受到毒株、抗原含量、佐剂、保质期等因素影响。在临床实际使用中,为何不同的疫苗免疫后抗体水平不同?为何选用与流行毒株“亲缘关系近”的疫苗,抗体水平依然不高,甚至发病?种种现象一度让使用者出现费解。本研究对两款不同口蹄疫产品进行临床免疫试验,为口蹄疫疫苗的科学选择及使用提供参考。
1、材料与方法
1.1 试验猪群
华南地区某规模化猪场,母猪存栏9,600头,两点式生产,封闭式管理,猪群整体健康状况良好。
1.2 试验材料
口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗(疫苗X、Y,分别购自天康生物制药有限公司和W公司)、蔗糖密度梯度形成仪、紫外分光光度计、口蹄疫O型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒(购自中国农业科学院兰州兽医研究所)。
1.3 试验方法
1.3.1疫苗抗原测定
采取蔗糖密度梯度离心法获得一定体积口蹄疫病毒146S病毒粒子,使用紫外分光光度计在259nm紫外光下检测吸收峰,从而测定口蹄疫疫苗抗原含量。
1.3.2免疫方案
分别选取经产母猪和9周龄仔猪进行试验,免疫方案见表1。
表1 试验免疫方案
1.3.3抗体测定
于免疫当天、免疫后8周对每组母猪随机采血;于免疫当天、免疫后4周对每组仔猪随机采血;分离血清,-20℃冷冻保存;进行猪口蹄疫O型抗体测定。口蹄疫O型抗体检测按照相应试剂盒说明书,判定标准:抗体效价<1:64为阴性,1:64—1:128为可疑,≥1:128为阳性。
2、结果分析
2.1 抗原146S含量检测结果
如图1所示:疫苗X的146S含量为33.7μg/ml,是疫苗Y的两倍多,二者差异显著。
图1 两种口蹄疫疫苗146S含量检测结果
2.2 O型抗体检测结果
2.2.1母猪抗体检测结果
如图2所示,免疫前两组抗体阳性率均低于80%,免疫8周后抗体有了明显提升,且Ⅰ组(疫苗X组)阳性率明显高于Ⅱ组(疫苗Y组)。Ⅰ组阳性率提升了19%;Ⅱ组抗体阳性率提升了12%,Ⅰ组增幅明显高于Ⅱ组。免疫前两组抗体离散度均较大,免疫后均降低,且Ⅰ组明显低于Ⅱ组;Ⅰ组离散度显著降低到10%,降幅达35%;Ⅱ组离散度降低到39%,降幅仅3%。
图2 母猪免疫前后O型抗体检测结果 图2 母猪免疫前后O型抗体检测结果
2.2.2仔猪抗体检测结果
如图3所示,免疫前两组抗体阳性率较高,均超过90%。免疫后,Ⅲ组阳性率升至100%,而Ⅳ组阳性率却降至65%。对比两组免疫后抗体效价,Ⅲ组不同效价的抗体比例均远高于Ⅳ组,且Ⅲ组抗体效价>1:512的比例高达70%,结果如图4。两组抗体结果差异显著。
图3 仔猪免疫前后O型抗体检测结果
图4 仔猪免疫后O型抗体检测结果
3、分析与讨论
当前,我国主要流行O、A型口蹄疫,亚洲Ⅰ型处于非免疫无疫状态。从监测情况看,当前我国口蹄疫流行毒株依然复杂,O型口蹄疫有Ind-2001e、Mya-98和CATHAY 等毒株,A 型为 Sea-97毒株。2021年发生3 起O型口蹄疫疫情,近 3 年未发生A型口蹄疫疫情。临床生产中往往监测O型抗体,2021年在边境地区监测到A型的 A/Sea-97 境外分支病毒,未来不排除A型口蹄疫点状发生的可能,因此应同时做好A型抗体的监测。近几年O型口蹄疫Ind-2001e检出率逐渐超越Mya-98毒株;同时Mya-98和CATHAY毒株变异较大,其主要功能基因序列与之前流行毒株差异较大,趋向形成新的进化分支,另外疫苗免疫猪血清对田间分离毒中和效价较低。
国际公认免疫口蹄疫疫苗是防控该病最经济有效的措施。目前,临床生产中主要使用的是口蹄疫灭活疫苗。此类疫苗抗原是完整的病毒颗粒(146S),具有充分的T细胞和B细胞位点。口蹄疫疫苗的免疫应答以体液免疫为主,在一定范围内抗原含量越高,产生抗体水平越高、抗体维持时间的也就越久。更为重要的是,抗原含量高,才能对扑朔迷离的田间流行毒株产生更好的交叉保护力。同时,抗原含量高,更容易削弱母源抗体的干扰作用,缩短甚至避免仔猪免疫空窗期。另外,合理的免疫程序对于充分发挥疫苗作用至关重要。
本研究评估了两款不同口蹄疫疫苗的抗原含量、母猪及仔猪免疫前后抗体变化情况。结果显示,两款疫苗抗原含量差距显著,疫苗X的146S显著高于疫苗Y。母猪群分别免疫后,抗体阳性率均显著提升,离散度均下降;但疫苗X组(天康生产)抗体的阳性率及离散度变化均明显优于疫苗Y组。同时也发现,该场母猪群抗体阳性率并未达到100%,这可能与猪群健康度或疫苗免疫程序有关,后续可以对母猪群进行加强免疫。仔猪群分别免疫后,抗体阳性率均显著变化;疫苗X组阳性率升至100%,而疫苗Y组却下降至65%,结果大相径庭;疫苗X组(天康生产)不同效价的抗体比例均远高于疫苗Y组。这可能与母源抗体的干扰作用有关,疫苗X由于抗原含量高,可以快速产生高水平的抗体,更大程度的削弱母源抗体的干扰作用。